【摘 要】
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目的：获得人CYP2E1重组酶，并用该重组酶的特征性探针底物对其进行代谢活性研究。方法：以人肝组织RNA为模板，通过RT—PCR得到CYP2E1cDNA片断，然后与pFastBac质粒连接，得到pFastBac—
【机 构】
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浙江大学药学院药物分析与药物代谢实验室
【基金项目】
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浙江省中医药管理局重点项目（20062016）,国家杰出青年基金项目（30225047）,浙江省科技厅重大科技攻关项目（2005C13026）.
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目的：获得人CYP2E1重组酶，并用该重组酶的特征性探针底物对其进行代谢活性研究。方法：以人肝组织RNA为模板，通过RT—PCR得到CYP2E1cDNA片断，然后与pFastBac质粒连接，得到pFastBac—CYP2Ej重组质粒，将其转化E．coli DH 10Bac大肠杆菌，通过转座作用，获得重组Bacmid—cyP2Ej，将其转染草地夜蛾细胞（Sf9）后，产生重组杆状病毒。将该病毒以及分别含有人CYPOR和人CYPb5的病毒共同感染Sf9细胞，收集共表达蛋白，以氯唑沙宗为底物鉴定重组酶的活性。结果
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