赤羽病毒G1基因的真核表达及抗原性检测

来源 :中国预防兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wangking88

【摘要】

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通过RT-PCR获得赤羽病毒（AKAV）OBE-1株的Gl基因，克隆至pMD18-T载体。经测序鉴定正确后，将该片段作为目的基因亚克隆至Bac-to-Bac杆状病毒表达系统中的pFastBacHTA转移载体质粒中，

【作者】

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徐树兰童铁钢白宇王群张维军孙庆歌吴东来

【机构】

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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所国家兽医生物技术重点实验室／人畜共患病室

【出处】

：

中国预防兽医学报

【发表日期】

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2008年6期

【关键词】

：

赤羽病毒 G1基因表达 Akabane virus glycoprotein GI gene expression

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通过RT-PCR获得赤羽病毒（AKAV）OBE-1株的Gl基因，克隆至pMD18-T载体。经测序鉴定正确后，将该片段作为目的基因亚克隆至Bac-to-Bac杆状病毒表达系统中的pFastBacHTA转移载体质粒中，利用Tn7转座子与穿梭我体Bacmid DNA同源重组，获得了重组杆状病毒DNA，用CELLFECTIN介导其转染Sf9昆虫细胞，获得重组杆状病毒BAC-G1P1。SDS-PAGE结果表明，感染BAC-GIP1后的Sf9昆虫细胞表达可溶形式的120ku目的蛋白，其大小与预期相符。Western

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