【摘 要】
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为获得条带清晰、稳定和多态性高的华山松ISSR扩增结果,对引物、Mg 2+ 浓度和退火温度等因素进行了优化.确定了ISSR分析的最佳PCR条件:15 μL反应体系中,10× PCR buffer反应
【基金项目】
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云南省应用基础研究计划项目(2008ZC092M);云南省教育厅科研基金研究生项目(2014J093);云南省优势特色重点学科生物学一级学科建设项目(50097505)
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为获得条带清晰、稳定和多态性高的华山松ISSR扩增结果,对引物、Mg 2+ 浓度和退火温度等因素进行了优化.确定了ISSR分析的最佳PCR条件:15 μL反应体系中,10× PCR buffer反应缓冲液1.5 μL,模板DNA 22.5 ng,Mg 2+ 2.2 mmol/L,dNTPs 0.23 mmol/L,引物0.93 μmol/L,Taq DNA聚合酶0.027 U/μL.PCR反应程序为:经94℃预变性4 min后,经过94℃变性30 s,Tm-4.8℃退火30 s,72℃延伸108
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