【摘 要】
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目的构建含miR-24基因的重组腺病毒,为后期研究miR-24在大鼠颈动脉球囊损伤所致血管再狭窄(RS)中的作用及分子机制奠定基础。方法 PCR钓取目的基因miR-24,连接入穿梭载体GV13
【机 构】
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三峡大学心血管病研究所,三峡大学第一临床医学院心内科
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目的构建含miR-24基因的重组腺病毒,为后期研究miR-24在大鼠颈动脉球囊损伤所致血管再狭窄(RS)中的作用及分子机制奠定基础。方法 PCR钓取目的基因miR-24,连接入穿梭载体GV139。采用Ad Max腺病毒包装系统,将构建的miR-24重组腺病毒穿梭质粒与辅助包装质粒(PBHG)共转染HEK293细胞,通过Cre/lox P重组酶系统的作用实现重组,得到重组腺病毒,并进行重组腺病毒扩增、纯化及滴度测定。结果成功构建了大鼠miR-24腺病毒载体,滴度为1×109PFU/ml。结论成功获得含miR-24基因的重组腺病毒,为后期顺利开展有关miR-24在血管RS中的作用及分子机制研究提供了可能。
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