【摘 要】
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目的探讨N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)在体外对流感病毒H1N1的抑制作用。方法采用MTT法、鸡胚接种法和免疫荧光法,观察NAC对流感病毒H1N1的抑制作用。采用血球凝集
【基金项目】
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2013年国家级大学生创新创业训练计划项目(201311258017);2013年辽宁省大学生创新创业训练计划项目(201311258017);2012年大连大学本科生创新创业项目基金(2012057)
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目的探讨N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)在体外对流感病毒H1N1的抑制作用。方法采用MTT法、鸡胚接种法和免疫荧光法,观察NAC对流感病毒H1N1的抑制作用。采用血球凝集试验、神经氨酸酶活性抑制试验和透射电镜负染技术,初步探讨NAC对流感病毒H1N1的抑制机制。结果 NAC在MDCK细胞上的最大无毒剂量是6.25 mg/mL;流感病毒H1N1在MDCK细胞上的半数致死感染浓度(TCID50)为10-2.25/100μL;在三种作用途径下(治疗性给药、预防性给药和直接灭活后给药),NAC明显抑制了流感病毒H1N1对MDCK细胞的感染,细胞存活率分别为91.88%、93.21%、94.67%,在对照组,流感病毒H1N1感染后的细胞存活率为28.32%,两者相比差异有统计学意义(P<0.05);免疫荧光结果显示,与病毒对照组形成的强特异性荧光相比,三种作用途径感染MDCK细胞后的特异性荧光明显减弱;鸡胚培养法的结果显示,NAC明显抑制了流感病毒H1N1在鸡胚内的增殖,实验组血凝效价低于1∶2,对照组血凝效价为1∶1024;神经氨酸酶活性抑制试验和透射电镜的结果显示,NAC能够明显抑制流感病毒H1N1的神经氨酸酶活性,对流感病毒H1N1的病毒体结构也有明显的破坏作用。结论 NAC在体外对流感病毒H1N1有明显的抑制作用,其抑制机制可能与NAC对流感病毒血凝素和神经氨酸酶活性抑制及病毒体的直接破坏有关。
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