【摘 要】
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目的:探讨C5a对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞增殖和迁移的影响及其潜在的分子机制.方法:RT-PCR和Western blot检测人正常支气管上皮细胞系BEAS-2B和3种NSCLC细胞系(H1703、PC9、H1299)中C5a受体(C5aR)的表达;CCK-8和划痕实验检测C5a对PC9细胞增殖和迁移的影响;Western blot检查C5a刺激PC9细胞后蛋白激酶Akt1、细胞外信号调节激酶1/2 (extracellular signal-r
【机 构】
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南京医科大学免疫学系,江苏南京211166;南京医科大学第一附属医院肿瘤科,江苏南京210029
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目的:探讨C5a对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞增殖和迁移的影响及其潜在的分子机制.方法:RT-PCR和Western blot检测人正常支气管上皮细胞系BEAS-2B和3种NSCLC细胞系(H1703、PC9、H1299)中C5a受体(C5aR)的表达;CCK-8和划痕实验检测C5a对PC9细胞增殖和迁移的影响;Western blot检查C5a刺激PC9细胞后蛋白激酶Akt1、细胞外信号调节激酶1/2 (extracellular signal-regulated kinase,ERK1/2)和蛋白激酶C-α (protein kinase C-α,PKC-α)表达及磷酸化水平;用Akt1抑制剂Perifosine和ERK1/2抑制剂U0126分别处理PC9细胞后再给予C5a刺激,Western blot检测Akt1和ERK1/2的表达和磷酸化及其上下游调控关系,CCK-8和划痕实验检测Perifosine和U0126对细胞增殖和迁移的影响.结果:PC9细胞C5aR的表达水平显著高于其他细胞;C5a可明显促进PC9细胞的增殖和迁移能力;C5a刺激PC9细胞后,可显著增强Akt1和ERK1/2的磷酸化;Akt1和ERK1/2抑制剂均能明显降低C5a刺激PC9细胞后引起的细胞增殖和迁移,且Akt1抑制剂不仅能减弱Akt1的磷酸化,还能减弱ERK1/2的磷酸化,而ERK1/2抑制剂则仅能阻断其自身的磷酸化.结论:C5a刺激NSCLC细胞后可能通过激活Akt1-ERK1/2通路促进细胞的增殖和迁移.
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