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为分离纯化制备高纯度的甘青乌头生物碱，通过对甘青乌头总生物碱的提取及含量测定，利用HPLC法测定甘青乌头酯型生物碱含量，单因素试验考察甘青乌头总生物碱和酯型生物碱提取条件。结果表明，以苯甲酸峰面积以及总生物碱的含量为参照标准，选取适宜的总生物碱提取方法，得到85℃为最佳提取温度，1.5 h为最佳提取，90%为乙醇的质量分数。高效液相色谱法精密度、重复性和稳定性良好，且操作简便，对甘青乌头质量控制理想。