【摘 要】
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目的观察华蟾素对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法采用巯基罗丹明B(SRB)法检测华蟾素对SH-SY5Y细胞的抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率,荧光探
【机 构】
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兰州大学第二医院急诊科; 兰州大学第二医院妇产科; 兰州大学第二医院检验科; 兰州大学第二医院药品研发科;
【基金项目】
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中央高校基本科研业务专项资金(lzujbky-2013-216)~~
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目的观察华蟾素对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法采用巯基罗丹明B(SRB)法检测华蟾素对SH-SY5Y细胞的抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率,荧光探针二乙酸二氯荧光素盐(DCFH-DA)法检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;罗丹明123(Rhodamine 123)染色法检测细胞线粒体膜电位;Western blot检测胞质细胞色素C(Cyt-C)的表达;ELISA检测Caspase-3和Caspase-9酶活性。结果华蟾素对SH-SY5Y细胞增殖具有明显抑制作用,且表现出剂量和时间依赖性。流式细胞术检测对照组及各浓度组凋亡率分别为(3.12±0.91)%、(17.65±4.28)%、(29.14±6.72)%、(50.01±9.26)%,与对照组比较,华蟾素组的凋亡率均显著性增高(P<0.01);华蟾素能够呈浓度依赖的增加细胞内ROS水平(P<0.01),降低线粒体膜电位(P<0.01),增加胞质中Cyt-C的表达(P<0.01),同时增加Caspase-3和Caspase-9酶活性。结论华蟾素能够通过诱导SH-SY5Y细胞产生凋亡而发挥增殖抑制作用,其作用机制可能与激发线粒体凋亡途径有关。
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