蜂毒素-SP94杂合基因原核表达载体的构建及蛋白纯化

来源 :河南师范大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户：cjp023

【摘要】

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用可以特异结合到肝癌细胞膜上的小肽SP94,与蜂毒素连接,构建重组表达载体pET32a-蜂毒素-SP94.转入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测表达结果,产物经Ni-NTA Agro

【作者】

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张红绪曹静周庆峰赵鹏金白洁王亚威刘琦李成伟

【机构】

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河南师范大学生命科学学院,商丘师范学院生命科学系

【出处】

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河南师范大学学报(自然科学版)

【发表日期】

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2011年3期

【关键词】

：

肝癌蜂毒素-SP94 载体构建表达纯化 liver cancer melittin-SP94 vector construction expression

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用可以特异结合到肝癌细胞膜上的小肽SP94,与蜂毒素连接,构建重组表达载体pET32a-蜂毒素-SP94.转入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测表达结果,产物经Ni-NTA Agrosc亲和层析柱纯化后进行Tricine-SDS-PAGE检测.重组蛋白在大肠杆菌中高效表达,约占细胞总蛋白的30%,超声破碎后50%的目的蛋白以可溶性形式存在,纯化后获得高纯度蛋白.本实验为肝癌的靶向治疗研究与临床应用提供了新思路.

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