猪源产肠毒素大肠杆菌菌毛基因多重PCR检测方法的建立及初步应用

来源 :中国预防兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangshuxi
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为建立一种可同时快速准确检测5种菌毛类型的产肠毒素大肠杆菌(ETEC)的多重PCR方法,本研究首先通过大肠杆菌特异性基因uidA的PCR方法鉴定大肠杆菌;选取国内外流行的携带K88、K99、F18ab、F18ac和F41菌毛基因的ETEC菌株,根据这5种菌毛基因的保守序列设计5对特异性引物,通过对反应条件的优化,建立了能同时检测上述5种菌毛ETEC的多重PCR方法。uidA基因的PCR结果显示,除了大肠杆菌有特异性扩增外,其他细菌均不能扩增,可以用于大肠杆菌的鉴定。菌毛多重PCR优化后的反应条件为:各混合
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