【摘 要】
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为了研究波形蛋白在介导猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染细胞过程中的作用,利用FIT-PCR方法从PRRSV非易感细胞系猪肾细胞系PK-15细胞中扩增目的基因,克隆入pET-28a(+)载体,转化大
【机 构】
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山东农业大学动物医学院,西北农林科技大学兽医免疫学研究所/西北农林科技大学动物医学院
【基金项目】
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国家自然科学基金重点项目“猪蓝耳病病毒感染所致病的分子机理”(U0931003/L01);国家自然科学基金项目“猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒通过胎盘屏障感染胎儿的受体机制”(30901063)
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为了研究波形蛋白在介导猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染细胞过程中的作用,利用FIT-PCR方法从PRRSV非易感细胞系猪肾细胞系PK-15细胞中扩增目的基因,克隆入pET-28a(+)载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达。表达的重组猪波形蛋白经SDS-PAGE和Westernblot鉴定和纯化后免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。利用病毒抑制试验检测重组猪波形蛋白及多克隆抗体在PRRSV感染Marc-145细胞过程中的作用。结果表明,成功扩增猪波形蛋白基因并克隆入pET-28a载体,经诱
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