【摘 要】
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目的 初步探讨p21和元件-1沉默转录因子(REST)基因在肥大细胞诱导前列腺癌细胞出现神经内分泌分化过程中的表达变化及两者的相关性.方法 利用孔径为0.4 μm的Transwell小室将人前列腺癌细胞(PC-3)与肥大细胞(P815)进行共培养,倒置显微镜观察PC-3细胞的形态变化;CCK-8实验及平板克隆形成实验检测诱导前后PC-3的细胞活性及增殖能力变化;实时荧光定量PCR法(RT-qPCR)检测诱导前后PC-3细胞中神经内分泌标志物[突触素(SYP)、嗜铬蛋白A(CHGA)和神经元特异性烯醇化酶(
【机 构】
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山西医科大学第一医院泌尿外科,太原030000;山西医科大学,太原030000
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目的 初步探讨p21和元件-1沉默转录因子(REST)基因在肥大细胞诱导前列腺癌细胞出现神经内分泌分化过程中的表达变化及两者的相关性.方法 利用孔径为0.4 μm的Transwell小室将人前列腺癌细胞(PC-3)与肥大细胞(P815)进行共培养,倒置显微镜观察PC-3细胞的形态变化;CCK-8实验及平板克隆形成实验检测诱导前后PC-3的细胞活性及增殖能力变化;实时荧光定量PCR法(RT-qPCR)检测诱导前后PC-3细胞中神经内分泌标志物[突触素(SYP)、嗜铬蛋白A(CHGA)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)]、p21、REST的mRNA表达变化.结果 与P815细胞共培养后,PC-3细胞形态从梭形变为较长的、带有树突状结构的不规则形,且细胞间隙变大.CCK-8实验结果显示,PC-3+P815组细胞OD值低于PC-3组细胞(P＜0.05),但是随着共培养时间的延长,PC-3+ P815组细胞OD值先下降后上升.平板克隆形成实验结果显示,P815浓度为104/孔、共培养4d的PC-3+ P815组细胞克隆形成率低于PC-3组细胞(P＜0.05).RT-qPCR实验结果显示,P815浓度为104/孔、共培养4d的PC-3+P815组细胞相对PC-3组细胞来说,NSE、SYP、CHGA表达显著上调(P＜0.05),p21表达上调(P＜0.05),REST表达下调(P＜0.05).结论 肥大细胞可能诱导前列腺癌细胞出现了神经内分泌分化,并且p21和REST基因与这一过程存在一定的相关性.
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