【摘 要】
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CRISPR-Cas系统作为下一代分子诊断技术在生物传感领域具有很强的应用前景。基于CRISPR-Cas12a的附属切割活性与血糖仪(PGM),构建了便携式PGM-CRISPR生物传感器,实现对三聚氰胺的定量、灵敏及特异性检测。靶标三聚氰胺与双链DNA探针中的核酸适配体特异性结合,并将另一条DNA释放出来。释放出来的DNA可以激活CRISPR-Cas12a的附属切割活性。激活后的CRISPR-Ca
【基金项目】
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四川省科技创新创业苗子工程重点项目(2022JDRC0126); 乐山师范学院引进人才启动项目(RC2022002); 大学生创新创业训练计划项目(202210649021,202210649023,S202210649173)资助;
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CRISPR-Cas系统作为下一代分子诊断技术在生物传感领域具有很强的应用前景。基于CRISPR-Cas12a的附属切割活性与血糖仪(PGM),构建了便携式PGM-CRISPR生物传感器,实现对三聚氰胺的定量、灵敏及特异性检测。靶标三聚氰胺与双链DNA探针中的核酸适配体特异性结合,并将另一条DNA释放出来。释放出来的DNA可以激活CRISPR-Cas12a的附属切割活性。激活后的CRISPR-Cas12a进一步切割电极上蔗糖酶修饰的单链DNA探针,将蔗糖酶修饰的DNA短片段释放到溶液中。溶液中的蔗糖酶催化蔗糖生成葡萄糖,从而产生可读取的PGM信号。在最优条件下,PGM响应信号与0.1 ~25 μmol/L范围内的三聚氰胺浓度呈良好的线性关系,检出限为37 nmol/L。该便携式PGM-CRISPR生物传感器具有很强的特异性,能够用于牛奶样品中三聚氰胺的定量检测。
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