重组Mash1慢病毒表达载体的构建

来源 :神经损伤与功能重建 | 被引量 : 0次 | 上传用户:airbter
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目的:克隆小鼠Mashl基因的全长cDNA,构建其慢病毒表达载体Lentivirus-Mashl,为进一步研究Mashl在神经发育及干细胞神经分化中的作用奠定基础。方法:应用RT-PCR从小鼠13d胚胎中扩增出Mashl cDNA片段,经回收纯化与pGEM-T载体连接并转化感受态细菌JM109,通过蓝白筛选、PCR扩增和双酶切鉴定出阳性菌落,并对其进行基因测序。BamHⅠ和XholⅠ双酶切pGEM-T-Mashl和Lentivirus获得的目的基因双粘片段与Lentivirus双粘线性质粒相连接,转化JM
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