人肝门部胆管癌细胞QBC939中Vimentin基因的siRNA构建研究

来源 :中国实验诊断学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bright545454
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目的 构建可抑制 Vimentin基因表达的 siRNA并转染进入人肝门部胆管癌 QBC939 细胞株,初步鉴定siRNA的干扰效果.方法 设计并合成 Vimentin(NM-003380)基因的可作用于不同位点的 3 种 siRNA及一组 siR-NA阴性对照序列,使用脂质体法将 3 种不同的 siRNA序列及阴性对照序列瞬时转染进入人肝门部胆管癌 QBC939细胞,分别命名为T1 组(siVIM-1)、T2 组(siVIM-2)、T3 组(siVIM-3)及 NC组(siCtrl),使用 RT-PCR、Q-PCR技术测定实验中各组细胞Vimentin在mRNA水平上的表达情况.结果 T1、T2 及T3 组 Vimentin在基因表达水平上均较NC组受到抑制,T2 组的抑制效果较T1 及T3 组更明显,差异具有统计学意义(P<0.01).结论 成功建立并筛选出人肝门部胆管癌细胞 QBC939 细胞 Vimentin基因的 siRNA.为后续进一步研究 Vimentin的生物学特性及在肝门部胆管癌 QBC939 细胞中的作用奠定了基础.
其他文献
《中国2型糖尿病防治指南(2017版)》指出:我国18岁以上人群糖尿病(DM)患病率为10.4%,前期流行率为35.7%,估计我国DM患者人数为3.88亿,且未诊断的DM患者约占总数的63%[1].2型糖尿病(T2DM)是最常见的以高血糖为特征的内分泌代谢紊乱性疾病,肥胖和超重是T2DM和心血管疾病独立危险因素[2-3].胰岛素抵抗(IR)在T2DM的发病机制中起着重要的作用[4-6].本文通过对T2DM患者肥胖、IR和生物标志物水平的临床研究,探讨其对T2DM诊治的意义.
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