[英]/Yoon JW…//Science. -1999,5417.-1183～1187rn 本实验利用转基因小鼠，研究了β胰岛细胞上谷氨酸脱羧酶(GAD)的表达与非肥胖糖尿病(NOD)小鼠糖尿病发病的确切关系。rn 将两种不同变异型的小鼠GAD cDNA(rGAD65和rGAD67)的反义基因转移到NOD小鼠的胚系细胞上，然后将这些干细胞植入雌性NOD鼠，经传代得到六个表达GAD反义基因的转基因NOD小鼠品系。将此六系小鼠分为两组，第1组小鼠根据它们表达的转移基因数目的相对多少记为H-AS-GAD-NOD系、M-AS-GAD-NOD系和L-AS-GAD-NOD系；第二组中的三系小鼠依同样的标准记为HK-AS-GAD-NOD系、MK-AS-GAD-NOD系和LK-AS-GAD-NOD系；对照组是相应数量的不表达GAD反义基因的NOD小鼠(Transgenic Negative，TN组)。蛋白免疫印渍分析结果表明：H-AS-GAD-NOD系小鼠完全抑制了GAD在β胰岛细胞上的表达，M-AS-GAD-NOD和L-AS-GAD-NOD则中度和轻度抑制了GAD的表达，而GAD在上述各实验组小鼠的脑组织中的表达却没有显著差别。rn 研究还监测了各系转基因NOD小鼠与TN组小鼠的糖尿病发病情况，发现第40周时，第1组15例H-AS-GAD-NOD系小鼠没有1例发病，而M-AS-GAD-NOD系、L-AS-GAD-NOD系和TN小组小鼠的发病率分别为67％(12 of 18)、75％(12 of 16)和81％(17 of 21)。第20周时组织学检查显示：H-AS-GAD-NOD系80％以上的胰岛未受损伤，患有胰岛周炎者少于20％；其它系和对照TN组的大部分小鼠患中度或严重的胰岛炎。第2组结果与第1组相似。作为转基因的对照，本研究将另一种细胞表面的自身抗原--内源性逆转录病毒衣壳蛋白的反义基因转移到NOD小鼠的染色体DNA上，发现即使这些小鼠完全表达了该转移基因，其糖尿病的发病率仍接近没有表达该基因的NOD小鼠(82％)。上述结果表明，NOD小鼠GAD的特异性缺失可防止NOD小鼠糖尿病的发生。rn 将20周雌性H-AS-GAD-NOD系小鼠的脾细胞输入到6～8周的联合T细胞缺陷的NOD小鼠(NOD.scid小鼠)体内，10周以后，8例NOD.scid小鼠没有1例发病；而将TN组小鼠的脾细胞输入到另外10只NOD.scid小鼠体内，10周后则有9例小鼠患了糖尿病。实验结果表明表达GAD反义基因的NOD小鼠体内GAD特异性的T细胞的增殖受到了抑制。rn 结论 研究认为GAD是GAD特异的T细胞引发NOD小鼠1型糖尿病的关键抗原，β胰岛细胞GAD的表达缺失可保护细胞免受T细胞介导的免疫攻击，可防止NOD小鼠1型糖尿病的发生。rn(沈文浩摘 白 云校)