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目的
采用同位素稀释液相色谱串联质谱技术（ID-LC-MS），建立一种对血清载脂蛋白E定量检测并分型的方法。
方法方法学建立。以同位素标记精氨酸的肽段为内标，对标本进行变性、烷基化和胰蛋白酶酶解处理，液相色谱部分采用SB-C18色谱柱分离，质谱部分采用正离子模式和多反应监测定量和分型。评价该方法的精密度、准确度和线性范围等。收集上海市东方医院2018年10至12月40份血清标本对ID-LC-MS和免疫法进行方法学比较。Deming回归和Bland-Altman分析用于方法学比较。SPSS 24软件用于线性评价中的多项式回归分析。
结果ApoE的所选酶解肽段在4 h内即达释放峰值，SE肽段3 h时达到释放峰值。对ApoE分型发现E3/E3、E2/E3和E3/E4型。实验室内不精密度均值为5.2%。低浓度和高浓度准确性评价标本的测定值与靶值的相对偏差分别为7.6%和3.6%。与免疫法比对，Deming回归的截距的95%置信区间为6.44~11.44（P<0.05），斜率的95%置信区间为0.77~0.89（P<0.05），两者的相关性r=0.97。两者差值的均值是-2.95 mg/L，95%置信区间为-4.26~1.65 mg/L。本方法在16.9~58.5 mg/L内呈线性关系。
结论本研究建立的ID-LC-MS方法可用于定量血清ApoE，并对ApoE进行蛋白分型。