论文部分内容阅读
从湖北地区一宫颈癌活检组织中提取DNA,采取加端聚合酶链反应(Add-on PCR)技术,获得了人乳头瘤病毒16型E7基因(HPV16 E7)。将该基因克隆于载体pUC18后,进行了该基因一级结构顺序分析。完整的HPV16 E7湖北株基因(HPV16E7-HB)全长294bp,与已发表的德国株(GS)大小一致,但其核苷酸顺序中有2处发生了变异,均为C→T变异。第43位CAA→TAA使相应的谷氨酰胺密码子变为终止密码,形成无义突变(Nonsense mutation)。将重组质粒中0.3kb的HPV16 E7基因在表达载体pWR590-1中进行克隆,经诱导使重组表达质粒在大肠杆菌中高效表达,得到了预计的、分子量约为69×103的融合蛋白。该蛋白的表达量占菌体总蛋白量的30%左右。该试验表明HPV16 E7一级结构以及所编码的蛋白多肽在不同的国家和/或不同的地区可能存在着差异。本文首次报道了中国地方株HPV16 E7基因的一级结构。