观察不同年龄段小鼠耳蜗中发动蛋白(Dynamin)各亚型的表达情况,初步探讨Dynamin与年龄相关性听力损失的关系。
方法分别取3周龄(幼年组)、10周龄(成年组)和16月龄(老年组)昆明小鼠每组各10只作为研究对象,检测其听性脑干反应(ABR)阈值;通过免疫荧光标记联合激光共聚焦显微镜观察耳蜗内毛细胞中Dynamin各亚型的定位表达情况;采用实时荧光定量多聚酶链反应(quantificational real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测各组小鼠耳蜗中Dynamin各亚型mRNA的转录水平。采用SPSS 18.0统计学软件进行数据分析。
结果成年组与幼年组小鼠ABR反应阈差异无统计学意义(t=–5.273,P=0.076),而老年组ABR反应阈明显升高,与幼年组和成年组相比差异具有统计学意义(t=–8.365,P=0.000;t=–6.191,P=0.000)。Dynamin各亚型在各年龄段小鼠耳蜗内毛细胞中均有表达,幼年组与成年组小鼠Dynamin-1、Dynamin-2均匀分布于细胞质中;老年组Dynamin-1在细胞核下方区域有部分缺失,Dynamin-2只表达于细胞核周围;各年龄组Dynamin-3均散在分布于细胞核下方基底部靠近螺旋神经节细胞树突的区域。qRT-PCR结果显示:Dynamin-1的表达量随年龄增长逐渐减少,差异具有统计学意义(F=10.410,P=0.011);Dynamin-2在成年组小鼠耳蜗中表达最高(F=24.575,P=0.000);未能检测出Dynamin-3的表达。
结论Dynamin各亚型在小鼠耳蜗内毛细胞中均有不同程度的表达;Dynamin-1、2随着年龄的增加表达发生改变,可能通过调节内毛细胞突触内吞作用影响听力;Dynamin-3由于表达量较少,与听觉的关系尚不明确。