目的:建立浙麦冬黄酮类成分的HPLC指纹图谱,并同时测定甲基麦冬二氢高异黄酮A和甲基麦冬二氢高异黄酮B的含量,为浙麦冬药材的质量控制提供依据。方法:采用Kromasil 100-5 C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.1%磷酸溶液(58∶42),流速1.0 m L·min-1,柱温30℃。结果:建立了浙麦冬黄酮类成分的HPLC指纹图谱,检出共有峰7个,各批次药材的相似度均>0.9;通过HPLC-MS分析和对照品比对,确定了1号峰和2号峰分别为甲基麦冬二氢高异黄酮A和甲基麦冬二氢高异黄酮B,并对其进行定量分析,结果浙麦冬中甲基麦冬二氢高异黄酮A的线性范围31.47~786.8 ng,平均回收率101.5%,甲基麦冬二氢高异黄酮B的线性范围53.05~1 326.25 ng,平均回收率103.0%。结论:HPLC指纹图谱方法与含量测定方法简便,结果准确,重复性好,可作为浙麦冬的质量控制方法。