重复水高压注射介导hHGF表达载体在小鼠体内的持续高效表达

来源 :实用肝脏病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:langya925
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目的 构建hHGF表达载体并通过水高压注射法研究hHGF在小鼠体内的持续表达。方法 从慢性乙型肝炎患者肝组织提取总RNA,RT-PCR扩增出hHGF基因的cDNA片段,将目的片断克隆至pMD18-T载体,酶切和测序鉴定,然后将目的片断酶切回收后插入pcDNA3.1质粒,构建真核表达载体pcDNA-hHGF,通过重复水高压注射法将pcDNA-hHGF导入小鼠肝脏,并在首次水高压注射后第0、3、6、9、12、15、18和21天分别收集小鼠血清和肝组织,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测hHGF在小鼠体内的表
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