猪胚胎成纤维细胞αGal表达的鉴定

来源 :中华器官移植杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fanjing0
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目的 确定猪胚胎成纤维细胞是否合成α1,3半乳糖苷,为下一步进行基因工程改造的结果提供鉴定方法.方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western免疫印迹法分别在转录和翻译水平确定猪胚胎成纤维细胞是否合成α1,3半乳糖苷.结果通过RT-PCR扩增,发现α1,3半乳糖苷转移酶基因在原代和传代培养的猪胚胎成纤维细胞内转录,Western免疫印迹证实,在原代和传代培养的猪胚胎成纤维细胞能合成含有α1,3半乳糖苷残基的糖蛋白.结论猪胚胎成纤维细胞可合成α1,3半乳糖苷;可采用PCR扩增和Western免疫印迹方法对经过基因工程改造的猪胚胎成纤维细胞是否表达α1,3半乳糖苷转移酶进行鉴定。

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