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肠毒素质粒（pEnt）由于缺乏耐药标志可供选择，给pEnt的研究工作带来一定的困难。有些学者利用TnA和Tn5转座到pEnt上，但他们的工作都是在获得pEnt质粒的基础上进行转座实验。本文设计一种直接把Tn5转座到野生型产毒性大肠杆菌中的肠毒素质粒上从而获得pEnt∷Tn5的质粒，这种带有Km标志的pEnt质粒可在E.coli K12、痢疾杆菌中接合传递，为肠毒素质粒的研究工作提供方便。