小鼠子宫内电转基因方法的建立

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目的:建立小鼠子宫内电转基因技术,比较分析转染绿色荧光蛋白(GFP)后对胚胎发育及相关蛋白表达的影响。方法:将怀孕15d的小鼠,水合氯醛麻醉后,取出两侧子宫,用毛细管注射针将2μg/μl的pCAGGS-GFP质粒0.5-1μl准确注射到胎鼠侧脑室,在电压40V、每次脉冲60ms,间隔940ms,电脉冲6次的条件下进行定时定位活体电转基因,电转后24h取材,甲醛固定冷冻冠状切片,DAPI染细胞核观察组织形态结构变化,荧光免疫组织化学检测α-SMA的表达差异。结果:妊娠15d孕鼠转染24h后小鼠成活率80%(
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