【摘 要】
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目的：研究Raf激酶抑制蛋白（RKIP）在细胞外对肿瘤细胞迁移的影响.方法：通过PCR扩增得到RKIP基因片段,使用BamH I和HindⅢ双酶切并回收,然后插入双酶切过的原核表达载体pET28a（＋）,得到
【机 构】
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南京大学医药生物技术国家重点实验室
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目的：研究Raf激酶抑制蛋白（RKIP）在细胞外对肿瘤细胞迁移的影响.方法：通过PCR扩增得到RKIP基因片段,使用BamH I和HindⅢ双酶切并回收,然后插入双酶切过的原核表达载体pET28a（＋）,得到pET28a-RKIP重组质粒.将重组质粒转化表达菌株BL21（DE3）,经IPTG诱导表达,表达产物经Ni＋金属螯合层析纯化得到His-RKIP重组蛋白.通过伤口愈合实验,观察不同浓度的重组RKIP在细胞外对肿瘤细胞迁移的影响.结果：重组RKIP获得了高效表达和分离纯化,伤口愈合实验表明,在低浓度重
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