Fsp27基因抑制原代肝星状细胞活化与活性的实验研究

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目的

探讨脂肪特异性蛋白27(fat-specific protein 27,Fsp27)基因对原代肝星状细胞(hepatic stellate cells, HSCs)增殖活化的影响和对纤维化相关基因的调节作用。

方法

实时定量PCR检测原代与活化HSCs中Fsp27基因表达。构建携带Fsp27的慢病毒并转染原代HSCs。CCK-8比色法检测Fsp27基因对HSCs增殖的影响。Western blotting检测HSCs α肌动蛋白(α-SMA)的表达,实时定量PCR检测Fsp27基因对HSCs纤维化相关基因表达的影响。

结果

原代与活化HSCs的Fsp27表达差异有统计学意义(Fsp27 mRNA:2 700±500,5±2,t=124.27,P<0.05)。带Fsp27目的基因的慢病毒转染原代HSCs 72 h后可明显抑制HSCs的活化(66.2±3.8,37.5±4.3,21.7±1.4,F=43.27,P<0.05)与增殖(48 h:31.5±1.3,6.1±0.1,t=17.35,P<0.05;72 h:36.2±2.2,6.2±0.1,t=21.94,P<0.05 );Fsp27基因促进基质金属蛋白酶2表达(0.48±0.02, 0.85±0.14,1.63±0.21,F=41.56,P<0.05),降低转化生长因子β1表达(3.2±0.17,2.0±0.3,1.7±0.2,F=21.52,P<0.05)。

结论

Fsp27基因抑制原代HSCs活化增殖,调节纤维化相关基因的表达,可能与维持HSCs静息状态细胞表型有关。

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