编码普通野生稻磷酸盐转运蛋白基因片段的分离与克隆

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以云南普通野生稻基因组DNA为模板,根据GeneBank中登记的编码小麦高亲和力磷酸转运蛋白基因保守序列设计一对特异引物,利用多聚酶链反应技术(PCR),扩增出目标基因(cwrpt)l 002 bp长度的基因片段并克隆到载体pGEM-T.经DIG标记探针杂交检测初筛、限制性内切酶酶切、PCR扩增、DNA序列分析与可能氨基酸序列同源性比较,此推定的氨基酸序列与小麦、水稻、拟南芥、番茄磷酸盐转运蛋白同源性很高,初步认为此基因片段为普通野生稻耐低磷胁迫相关磷酸盐转运蛋白的编码基因,获得全长序列与基因表达的进一步
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