【摘 要】
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目的探讨水通道蛋白-5(AQP-5)对细胞增殖及凋亡影响及可能的机制。方法体外常规培养人结直肠癌COLO 205和SW480细胞,取对数生长期的细胞用于实验。通过siRNA技术抑制内源性AQ
【机 构】
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西安交通大学医学部第二附属医院普通外科,淄博市中心医院胃肠外科,西安交通大学医学部第一附属医院普通外科
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目的探讨水通道蛋白-5(AQP-5)对细胞增殖及凋亡影响及可能的机制。方法体外常规培养人结直肠癌COLO 205和SW480细胞,取对数生长期的细胞用于实验。通过siRNA技术抑制内源性AQP-5的表达,并经免疫荧光、PCR检测AQP-5-siRNA转染效率,利用MTT法检测细胞增殖能力,Annexin V-FITC/PI和TUNEL检测细胞凋亡情况,RT-PCR和Western blot检测Bax、Bcl-2表达变化。结果在COLO 205和SW480细胞株中,转染AQP-5-siRNA后AQP-5表达下调达90%。MTT分析结果显示,与转染NS-siRNA组相比,转染AQP-5-siRNA组的细胞增殖抑制率显著增加(P<0.05);流式细胞分析结果发现,与NSsiRNA组细胞相比,转染AQP-5-siRNA后细胞凋亡率显著增加(P<0.05);荧光实时定量RT-PCR和蛋白质印迹法检测结果显示:与转染NS-siRNA组相比,转染AQP-5-siRNA明显提升Bax/Bcl-2 mRNA和蛋白的表达。结论 AQP-5-siRNA可体外促进结直肠癌细胞凋亡,其机制可能与Bax/Bcl表达有关。
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