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【目的】建立一种检测牛分枝杆菌的SYBRGreenI实时荧光定量PCR，为防控牛结核病提供技术支持。【方法】根据牛分枝杆菌特异性基因序列（No．MBU87961，gi9954088）设计合成一对扩增牛分枝杆菌的特异性引物，从引物设计、各成分配比、样品采集及样品DNA提取等方面进行优化，并对建立的方法进行标准曲线、溶解曲线分析及特异性、敏感性、重复性、临床样品检验试验。【结果】牛分枝杆菌SYBRGreenIX时荧光定量PCR的检测模板范围为1．O×10^9-1．0×10拷贝／μL时，其标