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采用L16（4^5）正交设计，得出猪苓原生质体制备最佳条件是取菌龄7d的菌丝体，以2％溶壁酶，0．6mol·L^-1甘露醇作为渗透压稳定剂，在33℃下酶解3h，原生质体数达到2．62×10^7个·mL^-1。原生质体再生的最佳条件是取菌龄5d的菌丝体，以2％溶壁酶，0．6mol·L^-1蔗糖作为渗透压稳定剂，在27℃的条件下，酶解3h。猪苓原生质体再生的最佳培养基为葡萄糖10g、麦芽糖5g、酵母粉4g、0．6mol·L^-1甘露醇、琼脂5．5g，定容到10