【摘 要】
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目的依据胚胎干细胞(Embryonic Stem Cell,ESC)具有向心肌细胞分化的能力,建立体外分化发育毒性评价模型,并应用其评价受试物白藜芦醇胚胎发育毒性。方法悬滴转悬浮法培养D3
【机 构】
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军事医学科学院疾病预防控制所毒理学评价研究中心; 国家食品安全风险评估中心卫生部食品安全风险评估重点实验室;
【基金项目】
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国家科技部国际合作项目(2008DFB300090);国家重点基础研究发展计划(973计划)课题(2011CB503803)
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目的依据胚胎干细胞(Embryonic Stem Cell,ESC)具有向心肌细胞分化的能力,建立体外分化发育毒性评价模型,并应用其评价受试物白藜芦醇胚胎发育毒性。方法悬滴转悬浮法培养D3系胚胎干细胞(ESC-D3),观察受试物对ESC-D3分化能力影响,结合MTT法判断受试物对ESC-D3及小鼠胚胎成纤维细胞(3T3)的细胞毒性结果,预测受试物的发育毒性。用已知无胚胎发育毒性化合物青霉素(Penicillin,PN),强胚胎发育毒性化合物氟尿嘧啶(5-Fluorouracil,5-FU)等对模型进行有效性验证,并将经过验证的EST模型用于受试物白藜芦醇的发育毒性评价。结果利用建立的EST模型对5-FU和PN的发育毒性进行评价,结果为5-FU为强胚胎发育毒性,PN为无胚胎发育毒性,与文献报道一致。应用EST模型评价得出白藜芦醇对3T3细胞活力的半数抑制浓度IC503T3为27.93μg/ml,对D3细胞活力的半数抑制浓度IC50D3为28.02μg/ml,对D3细胞的半数分化抑制浓度ID50D3为158.97μg/ml,经EST模型判断公式计算得出该化合物无发育毒性化合物。结论建立的EST模型的有效性验证结果与ECVAM的结论一致,可用于胚胎发育毒性的筛选和评价;经EST模型评价,白藜芦醇为无胚胎发育毒性。
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