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多组分三维荧光重叠光谱是三维荧光光谱的数据解析中的难点之一。本文基于二维微分谱的计算原理,充分利用三维荧光光谱具有激发光谱和发射光谱的特点,获得了三维荧光光谱展开后的激发微分谱和发射微分谱.之后利用独立成分分析对激发光谱或发射光谱的多组分混合微分谱分别进行解析,得到了单一组分的激发微分谱和发射微分谱。其中三次样条插值有效的弥补了实测激发波长数据点少的缺点,而粗糙惩罚平滑技术的引入则很大程度上减少了发射光谱的噪声,为微分谱的计算提供了有利的条件。单一组分的标准谱与解析谱的相似性系数的计算表明,利用独立成分分