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应用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)联合液相串联质谱技术分析骨关节炎患者关节液中差异蛋白,寻找潜在的骨关节炎生物标记物。
方法30例患者依据K-L评分分为对照组(K-L评分0级),早期OA患者(K-L评分Ⅱ级)、晚期OA患者(K-L评分Ⅳ级),每组10例。收集3组患者的膝关节液,经去除高丰度蛋白处理后行iTRAQ标记联合液相串联质谱技术检测,对检测结果进行Gene ontology、Pathway等分析,寻找3组之间明显差异蛋白。2组间比较采用t检验。
结果本研究从关节液中共检测出1 283种蛋白,其中有268种蛋白为首次在关节液中发现。早期OA患者与对照组关节液中差异蛋白相比上调72种,下调249种;晚期OA患者与对照组关节液中差异蛋白相比上调128种,下调141种;晚期OA患者与早期OA患者关节液中差异蛋白相比上调128种,下调141种。3组之间明显差异且上调的蛋白共有8种。
结论应用iTRAQ技术可以从关节液中检测出大量蛋白;通过对这些蛋白的深入分析,有助于了解OA的发病机制及发现新的OA生物标记物。