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表达高致病性猪蓝耳病病毒GP5重组伪狂犬病病毒的构建及鉴定

来源 :中国预防兽医学报 | 被引量 : 23次 | 上传用户：a4253272566

【摘 要】

：

将PCR扩增的高致病性猪蓝耳病病毒(HP-PRRSV)HuN4株GP5基因与含绿色荧光蛋白(EGFP)基因的表达盒插入到伪狂犬病毒通用转移载体pgG-uni中,构建了转移载体pgG-HPGP5-EGFP。通过磷酸钙法将转移载体pgG-HPGP5-EGFP和PRV Bartha-K61株的基因组共转染Vero细胞,经过8轮荧光蚀斑筛选和PCR鉴定获得了稳定表达EGFP的重组病毒,命名为rPRV-HP

【作 者】

：

陈瑾 田志军 彭金美 王瑜 周艳君 安同庆 童光志 

【机 构】

：

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／猪传染病研究室,中国农业科学院上海兽医研究所,华中农业大学动物医学学院

【出 处】

：

中国预防兽医学报

【发表日期】

：

2009年01期

【关键词】

：

高致病性蓝耳病病毒 HUN4 GP5 伪狂犬病病毒 重组 HP-PRRSV  HUN4  GP5  PRV  recombination 

【基金项目】

：

国家“973”计划（2005CB523200）,十一五国家科技支撑计划（2006BAD06A04/18）

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将PCR扩增的高致病性猪蓝耳病病毒(HP-PRRSV)HuN4株GP5基因与含绿色荧光蛋白(EGFP)基因的表达盒插入到伪狂犬病毒通用转移载体pgG-uni中,构建了转移载体pgG-HPGP5-EGFP。通过磷酸钙法将转移载体pgG-HPGP5-EGFP和PRV Bartha-K61株的基因组共转染Vero细胞,经过8轮荧光蚀斑筛选和PCR鉴定获得了稳定表达EGFP的重组病毒,命名为rPRV-HPGP5。IFA和western blot结果证实HP-PRRSV HuN4株GP5在重组病毒中得到了有效

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