【摘 要】
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通过PCR从质粒pUC18-169中扩增得到N-氨甲酰氨基酸水解酶基因(hyuC),置于原核表达载体pQE60的T5启动子下游构成表达质粒pQE60-hyuC,并在大肠杆菌M15中实现了该基因的高表达.S
【机 构】
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军事医学科学院生物工程研究所,军事医学科学院生物工程研究所
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通过PCR从质粒pUC18-169中扩增得到N-氨甲酰氨基酸水解酶基因(hyuC),置于原核表达载体pQE60的T5启动子下游构成表达质粒pQE60-hyuC,并在大肠杆菌M15中实现了该基因的高表达.SDS-PAGE检测表达产物,在相对分子量44kD处有一表达带,经薄层扫描分析目的蛋白占全菌蛋白的40%,主要以可溶性形式存在.酶活性分析结果表明,工程菌M15/pQE60-hyuC的N-氨甲酰氨基酸水解酶的比活分别比原始菌株Arthrobacter BT801和亚克隆DH5α/pUC18-169提高了52
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