【摘 要】
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为了方便利用RNA干涉(RNAinterference,RNAi)研究植物基因的功能,本研究构建了2个用于RNAi的植物转化载体pRNAi-35S和pRNAi-Ubi。这两个载体以pCAMBIA双元载体为骨架,含有2个
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为了方便利用RNA干涉(RNAinterference,RNAi)研究植物基因的功能,本研究构建了2个用于RNAi的植物转化载体pRNAi-35S和pRNAi-Ubi。这两个载体以pCAMBIA双元载体为骨架,含有2个多克隆位点区进行目的基因片段的正向和反向克隆,并分别由CAMV35S启动子和玉米泛素基因启动子控制发夹结构RNA的产生。为了验证该载体的有效性,用PCR扩增了1个水稻转录因子(ArabidopsisAP2/EREBP同源基因)基因片段组装入pRNAi-Ubi,转化水稻获得转化体。在所检测的7株转化株中,5株的内源目标基因的mRNA被降低至RNAblot检测不到的水平。这些结果说明本研究构建的RNAi载体对基因表达沉默是有效的。
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