【摘 要】
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目的:研究P-糖蛋白抗原表位和表达.方法:联合应用多种方法对P-糖蛋白的二级结构和表面特性进行分析,设计了一对引物,PCR扩增产物插入到pGEM-T中,经测序正确后,再克隆入表达载
【机 构】
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第三军医大学第二附属医院泌尿外科,军事医学科学院基础医学研究所肿瘤分子生物室,北京大学泌尿外科研究所
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目的:研究P-糖蛋白抗原表位和表达.方法:联合应用多种方法对P-糖蛋白的二级结构和表面特性进行分析,设计了一对引物,PCR扩增产物插入到pGEM-T中,经测序正确后,再克隆入表达载体pGEX-2T,构建高效表达载体pGEX-Pgp,转化大肠埃希菌DH5α,进行表达、鉴定及纯化.结果:位于P-糖蛋白胞外段的抗原表位位点仅见于氨基酸残基82～115(I)、741～760(IV)及800～816(V).SDS-PAGE分析,表达出约30×103(30 kDa)大小的蛋白.结论:该基因片段的高效表达为进
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