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目的
观察高氧环境下不同肺细胞的形态和功能改变。
方法体外分离培养18 d胎鼠的Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECⅡ)和肺成纤维细胞(LFs),并将其分为空气组(置于常氧培养箱,氧体积分数0.21培养)和高氧组(置于高氧培养小室,氧体积分数0.90培养)。镜下观察两种细胞的形态学改变;通过划痕实验观察细胞迁移情况;用流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)水平及细胞凋亡情况。
结果高氧培养8 h,镜下观察AECⅡ细胞体积增大,排列疏松;LFs细胞间隙增大,排列杂乱。划痕实验显示,与空气组比较,高氧处理6 h即可抑制AECⅡ细胞的迁移能力〔细胞迁移度:(38.67±1.15)%比(58.67±2.31)%,P<0.01〕,12 h即可促进LFs细胞的迁移〔细胞迁移度:(55.37±1.50)%比(46.90±1.20)%,P<0.01〕。随高氧时间延长,AECⅡ、LFs细胞内ROS含量均逐渐增加,12 h时已显著高于空气组(荧光强度:130.67±4.04比54.67±2.51,85.00±2.00比60.33±1.52,均P<0.01)。两种细胞均在高氧暴露后出现凋亡,暴露2 h时AECⅡ凋亡细胞率即较空气组明显增高〔(1.93±0.28)%比(1.07±0.11)%,P<0.05〕,暴露6 h时LFs凋亡细胞率即较空气组明显增高〔(1.66±0.09)%比(1.46±0.09)%,P<0.05〕。
结论高氧可引起肺细胞生长不良,使AECⅡ迁移水平降低而LFs迁移增加,肺细胞内ROS大量生成,最终引起肺细胞大量凋亡。