实时荧光定量PCR检测人肝癌组织皮层肌动蛋白基因

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目的建立实时荧光定量PCR检测皮层肌动蛋白基因表达水平的方法。方法提取人肝癌组织总RNA,RT—PCR扩增CTTN和GAPDH基因片段并分别构建两片段阳性表达载体。采用SYBR Green I实时荧光定量PCR绘制两基因拷贝数标准曲线,实测人肝癌标本并进行方法学评价。结果成功构建pMD18-T(+)/CTTN和pMD18-T(+)/GAPDH重组质粒。CTTN和GAPDH基因模板拷贝数分别在1.6×10^3-1.6×10^7和1.6×10^4-1.6×10^7之间时
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