【摘 要】
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目的采用双向电泳分析水蛭(Hirudo)酒炙前后差异蛋白表达。方法分别采用饱和硫酸铵沉淀法、三氯乙酸/丙酮沉淀法、直接裂解液法提取生水蛭和酒炙水蛭蛋白,十二烷基硫酸钠-丙
【机 构】
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首都医科大学中医药学院,中医络病研究北京市重点实验室,锦州医科大学药学院,解放军302医院全军中药研究所
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目的采用双向电泳分析水蛭(Hirudo)酒炙前后差异蛋白表达。方法分别采用饱和硫酸铵沉淀法、三氯乙酸/丙酮沉淀法、直接裂解液法提取生水蛭和酒炙水蛭蛋白,十二烷基硫酸钠-丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对这3种方法进行筛选,建立双向电泳体系。分析水蛭酒炙前后蛋白表达谱,寻找相关差异蛋白。结果直接裂解液法所得条带数量最多,分布连贯清晰。水蛭酒炙前后蛋白含有量有显著性差异(P<0.01),共发现19个差异蛋白点,其中下调蛋白8个,上调蛋白11个。结论双向电泳所得差异蛋白可作为蛋白标志物以规范水蛭炮制工艺,并确保其稳定性。
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