【摘 要】
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目的：探讨衰老SH-SY5Y细胞氧糖剥夺/再灌注模型的建立。方法：将SH-SY5Y细胞随机分为对照（D-半乳糖0mmol/L）、D-半乳糖（25mmol/L、50mmol/L、100mmol/L、200mmol/L、400mmol/L）组，分别给予对应浓度的D-半乳糖处理48h，显微镜观察细胞形态的改变、β-半乳糖苷酶试剂盒检测β-半乳糖苷酶活性、EdU试剂盒检测细胞增殖率以及CCK-8法检测细胞
【基金项目】
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广西医科大学青年科学基金资助项目（GXMUYSF202127）；
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目的：探讨衰老SH-SY5Y细胞氧糖剥夺/再灌注模型的建立。方法：将SH-SY5Y细胞随机分为对照（D-半乳糖0mmol/L）、D-半乳糖（25mmol/L、50mmol/L、100mmol/L、200mmol/L、400mmol/L）组，分别给予对应浓度的D-半乳糖处理48h，显微镜观察细胞形态的改变、β-半乳糖苷酶试剂盒检测β-半乳糖苷酶活性、EdU试剂盒检测细胞增殖率以及CCK-8法检测细胞存活率，确定D-半乳糖致衰浓度，建立衰老模型。将衰老SH-SY5Y细胞随机分为对照（氧糖剥夺不处理）、氧糖剥夺处理（0.5h、1h、1.5h、2h）组，随后复糖复氧24h，CCK-8检测衰老SH-SY5Y细胞存活率。结果：25mmol/L、50mmol/L组的细胞形态、β-gal活性与对照组比较没有明显变化（P＞0.05），100mmol/L组细胞可见胞体肥大，200mmol/L组细胞染色质固缩，400mmol/L组细胞出现大量空泡化；（100mmol/L～400mmol/L）组细胞β-半乳糖苷酶染色阳性率与对照组比明显升高（P＜0.05），100mmol/L、200mmol/L组间差异不大（P＞0.05）；（100mmol/L～400mmol/L）组细胞增殖能力明显下降，呈浓度依赖性降低（P＜0.05）；细胞存活率呈浓度依赖性降低（P＜0.05），IC50（half maximal inhibitory concentration 半抑制浓度）在100mmol/L和200mmol/L之间。衰老SH-SY5Y细胞存活率呈氧糖剥夺时间依赖性降低（P＜0.05），IC50接近1h。结论：D-半乳糖浓度为100mmol/L且作用细胞48h，可建立存活率约50%的衰老SH-SY5Y细胞模型，氧糖剥夺衰老SH-SY5Y细胞1h再灌注24h可建立存活率接近50%的衰老SH-SY5Y细胞氧糖剥夺/再灌注模型。
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