【摘 要】
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背景:脂肪基质细胞在特定条件下可以向脂肪细胞分化,然而,脂肪基质细胞脂向分化的分子机制仍不明确!目的:明确miRNA在脂肪基质细胞脂向分化过程中是否发挥作用及其可能机制.
【机 构】
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四川大学口腔疾病研究国家重点实验室,四川省成都市,610041灵武市人民医院口腔科,宁夏回族自治区灵武市,751400;焦作煤业集团中央医院口腔科,河南省焦作市,454002;
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背景:脂肪基质细胞在特定条件下可以向脂肪细胞分化,然而,脂肪基质细胞脂向分化的分子机制仍不明确!目的:明确miRNA在脂肪基质细胞脂向分化过程中是否发挥作用及其可能机制.设计、时间及地点:观察对照试验,于2007-10/2008-03在四川大学口腔疾病研究国家重点实验室完成.材料:出生30 d健康雄性SD幼鼠8只,取出脂肪,采用密度梯度离心结合贴壁培养法获得了纯度高的脂肪基质细胞.方法:采用脂向诱导液对第3代的脂肪基质细胞进行诱导培养.建立脂肪基质细胞体外脂向分化细胞模型,采用miRNA芯片技术筛选脂肪基质细胞向脂肪细胞方向分化的相关miRNA,使用实时定量聚合酶链反应技术对芯片结果进行验证.主要观察指标:①细胞形态学.②PPAR γ免疫细胞化学染色和油红O染色.③miRNA芯片结果.④实时定量聚合酶链反应结果.结果:①经显微镜下观察、油红O染色及PPAR γ免疫细胞化学染色检测证实脂肪基质细胞已经脂向分化.②miRNA芯片发现诱导组中miRNA-22的表达量呈下降趋势.③实时定量聚合酶链反应结果证实miRNA-22的表达量与对照组相比显著减少(P＜0.05).结论:miRNA-22存脂肪基质细胞脂向分化后的表达有显著降低,提示miRNA-22可能参与脂肪基质细胞的脂肪分化调控过程,生物信息学分析提示,该过程可能通过对其靶基因MAPK7(ERK5)的调控而实现.
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