牛γ-干扰素基因在大肠杆菌中的克隆

来源 :大连轻工业学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：zhouwei9471

【摘要】

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根据牛γ-干扰素(bovIFN-γ)基因的cDNA序列设计了一对引物.应用一步法逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从奶牛脾脏淋巴细胞的总RNA中扩增出特异性片段,将RT-PCR产物克隆

【作者】

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潘志明孙辉王运吉

【机构】

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大连轻工业学院

【出处】

：

大连轻工业学院学报

【发表日期】

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2005年2期

【关键词】

：

大肠杆菌 Γ-干扰素基因克隆 IFN-γ 聚合酶链式反应限制性酶切分析脾脏淋巴细胞 PCR产物序列设计 cDNA 总RNA 基因序列表达载体基因片段

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根据牛γ-干扰素(bovIFN-γ)基因的cDNA序列设计了一对引物.应用一步法逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从奶牛脾脏淋巴细胞的总RNA中扩增出特异性片段,将RT-PCR产物克隆到pMD18-T载体中,经过限制性酶切分析、测序证实扩增得到的bovIFN-y基因序列正确.将该基因片段切下并克隆到大肠杆菌表达载体pGEX-4T-1中,将pGEX-4T-1/bovIFN-y转化到大肠杆菌中DH 5a中.

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