翠云草提取物调控miR-145对肝星状细胞增殖、凋亡的影响

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目的:探讨翠云草提取物对肝星状细胞增殖、凋亡的影响及分子机制.方法:分别用12.5,25.0,50.0μg·ml-1翠云草提取物处理肝星状细胞HSC-T6,分别记为翠云草提取物低、中、高浓度组;未经任何处理的细胞作为对照组.将miR-145转染至HSC-T6细胞中,记为miR-145组;将miR-145转染至HSC-T6细胞后再用50.0μg·ml-1翠云草提取物处理,记为翠云草提取物+ miR-145组.细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞活性;克隆形成实验检测细胞克隆形成数;蛋白质印迹(Western blot)法检测细胞增殖核抗原Ki67、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-145表达水平.结果:与对照组比较,翠云草提取物中、高浓度组肝星状细胞的吸光度(A)值、克隆形成数、Ki67表达水平显著降低,细胞凋亡率、caspase-3和miR-145表达水平显著升高,且呈浓度依赖性(P<0.05).过表达miR-145可抑制肝星状细胞HSC-T6增殖,促进细胞凋亡,且miR-145增强了翠云草提取物对肝星状细胞增殖、凋亡的影响.结论:翠云草提取物可通过上调miR-145抑制肝星状细胞增殖、促进细胞凋亡.
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