【摘 要】
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为了得到人TRAIL cDNA并克隆到pGEM-T Vector.利用PCR技术获得目的基因片段,通过原核表载体pBV220构建人TRAIL表达质粒.将所得表达质粒转化宿主菌DH5α,培养至OD600值到达0.6
【机 构】
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陕西科技大学生命科学与工程学院,空军总医院分子生物学中心实验室
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为了得到人TRAIL cDNA并克隆到pGEM-T Vector.利用PCR技术获得目的基因片段,通过原核表载体pBV220构建人TRAIL表达质粒.将所得表达质粒转化宿主菌DH5α,培养至OD600值到达0.6时42℃诱导表达,并通过SDS-PAGE分析表达结果.经凝胶薄层扫描,对pBV-TRAILD/DH5α工程菌热诱导5h,TRAIL衍生物蛋白的表达量最高约占菌体可溶性总蛋白的31%.人TRAIL基因,通过pBV220原核表达载体可在大肠杆菌中获得高效表达.
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