持续表达HCV NS5B的Bel-7402细胞系的构建与鉴定

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HCV NS5B是HCV复制所必需的RNA依赖的RNA聚合酶和抗HCV药物的一个理想靶标,构建持续表达NS5B的肝细胞系将有助于研究HCV在肝细胞的复制机制和抗HCV药物的研发。ScaI酶切含有NSSB基因的重组表达载体pcDNA-5B,获得的线性化pcDNA-5B通过脂质体转染人肝癌细胞系Bel-7402细胞,CA18筛选转染细胞。阳性细胞经基因组PCR、RT—PCR和Western Blot鉴定,证实获得持续表达NSSB的Bel-7402细胞系。体外复制试验和荧光素酶试验表明:Bel-7402细胞表达
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