【摘 要】
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目的 探讨细胞粘附分子1（CADM1）修饰的骨髓间充质干细胞（BMSC）对口腔癌细胞生长与免疫相关指标的影响及机制。方法 分离培养5只BALB/c小鼠BMSC,分为腺病毒感染CADM1-BMSC组及阴性对照腺病毒感染NC-BMSC组；收集病毒感染BMSC的培养上清液，将人口腔癌细胞HSC3分为空白对照组、BMSC组、NC-BMSC组和CADM1-BMSC组，CCK-8法、EdU染色和细胞克隆形成实
【基金项目】
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河南省医学科技攻关计划联合共建项目（LHGJ20190603）；
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目的 探讨细胞粘附分子1（CADM1）修饰的骨髓间充质干细胞（BMSC）对口腔癌细胞生长与免疫相关指标的影响及机制。方法 分离培养5只BALB/c小鼠BMSC,分为腺病毒感染CADM1-BMSC组及阴性对照腺病毒感染NC-BMSC组；收集病毒感染BMSC的培养上清液，将人口腔癌细胞HSC3分为空白对照组、BMSC组、NC-BMSC组和CADM1-BMSC组，CCK-8法、EdU染色和细胞克隆形成实验检测细胞生长情况，乳酸脱氢酶（LDH）释放法检测NK-92MI对细胞的杀伤作用，实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测细胞免疫因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、γ-干扰素（IFN-γ）、转化生长因子-β1（TGF-β1）表达水平，蛋白质印迹检测细胞负性调节区域因子1（NCR1）与自然杀伤因子蛋白46（NKP46）的表达水平，流式细胞术检测细胞NKP46表达水平。结果 成功分离到小鼠源BMSC,经CADM1腺病毒感染的BMSC可见明显的绿色荧光蛋白表达。对照组、NC-BMSC组、CADM1-BMSC组的CADM1 mRNA相对表达量分别为1.00±0.05、1.01±0.06和3.65±0.32,CADM1-BMSC组上升，差异有统计学意义，F=32.145,P＜0.001;各组CADM1蛋白相对表达量分别为0.42±0.04、0.40±0.03和1.28±0.09,CADM1-BMSC组上升，差异有统计学意义，F=25.674,P＜0.001。空白对照组、BMSC组、NC-BMSC组和CADM1-BMSC组的细胞增殖活性、EdU标记的阳性细胞比例及细胞克隆形成数目之间差异均有统计学意义，均P＜0.05;CADM1-BMSC组细胞增殖活性下降，且EdU标记的阳性细胞比例与细胞克隆形成数目均减少，F值分别为248.334和357.214,均P＜0.001;各组细胞内TNF-α、IFN-γ及TGF-β1 mRNA相对表达量之间差异均有统计学意义，均P＜0.05;CADM1-BMSC组的细胞内TNF-αmRNA相对表达量和IFN-γmRNA相对表达量均下调，TGF-β1 mRNA相对表达量上调，F值分别为32.019、40.127和76.454,均P＜0.001。此外，NK-92MI细胞对肿瘤细胞的杀伤率升高，NCR1蛋白和NKP46相对表达量分别上调为1.22±0.09、2.21±0.19,差异均有统计学意义，F值分别为49.517、64.668,均P＜0.001;NKP46表达也升高至（42.68±4.05）%,差异有统计学意义，F=124.632,P＜0.001。结论 CADM1基因修饰的BMSC可抑制人口腔癌HSC3细胞生长，调节细胞释放细胞因子，增强NK-92MI细胞免疫杀伤性，其机制可能与调控NCR1/NKP46表达有关。
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