【摘 要】
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目的研究肿瘤生长抑制因子4(ING4)和白细胞介素－24(IL－24)双基因共表达腺病毒载体对肺腺癌细胞SPC－A－1的体内外放疗增敏作用及其潜在的作用机制。方法用Western blot法检测ING4和IL－24在SPC－A－1细胞中的表达；四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法和流式细胞仪分别检测Ad－ING4－IL－24联合放疗对SPC－A－1肺腺癌细胞的生长抑制作用和促凋亡作用。应用抽签法将25只
【机 构】
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215006 苏州大学附属第一医院呼吸内科（现在江苏省常熟市第二人民医院呼吸内科）,215006 苏州大学附属第一医院呼吸内科,基础医学院细胞与分子生物学教研室,215006 苏州大学附属第一医院呼吸
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目的研究肿瘤生长抑制因子4(ING4)和白细胞介素－24(IL－24)双基因共表达腺病毒载体对肺腺癌细胞SPC－A－1的体内外放疗增敏作用及其潜在的作用机制。
方法用Western blot法检测ING4和IL－24在SPC－A－1细胞中的表达；四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法和流式细胞仪分别检测Ad－ING4－IL－24联合放疗对SPC－A－1肺腺癌细胞的生长抑制作用和促凋亡作用。应用抽签法将25只裸鼠随机均分为5组：PBS组、腺病毒(Ad)组、双基因组、放疗组及联合组，除放疗组外其余各组均采用瘤体内注射干预用药，隔日1次，共注射6次。第1次治疗前及开始治疗后隔日测量各组瘤体的长径(L)和短径(W)，计算瘤体体积(V＝L×W2/2)，绘制瘤体体积－时间变化曲线。采用SPC－A－1细胞株建立肺腺癌裸鼠模型，观察Ad－ING4－IL－24联合放疗对移植瘤的抑制作用。免疫组织化学法检测天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶－3(Caspase－3)、B细胞淋巴瘤/白血病－2(Bcl－2)、Bcl－2相关X蛋白(Bax)及血管内皮细胞生长因子(VEGF)基因的表达。采用金正均法计算q值并判断其放疗增敏作用。
结果Western blot法检测结果显示，目的基因在SPC－A－1细胞中成功表达；MTT和流式细胞仪检测结果显示，Ad－ING4－IL－24联合放疗组对SPC－A－1细胞的生长抑制和促细胞凋亡作用[(86.2±0.8)%、(60.9±1.0)%]明显高于Ad－ING4－IL－24双基因组[(49.8±0.3)%、(26.3±1.3)%]和放疗组[(44.4±2.2)%、(33.3±0.8)%](生长抑制率比较，F＝550.88，P<0.01；凋亡率比较，F＝614.08，P<0.01)，Ad－ING4－IL－24联合放疗具有放疗增敏协同作用(q＝1.20)；裸鼠体内瘤重抑瘤率Ad－ING4－IL－24组、放疗组及Ad－ING4－IL－24联合放疗组分别为49.5%(样本5只)、35.4%(样本5只)和79.8%(样本5只)，Ad－ING4－IL－24联合放疗能明显抑制移植瘤生长，具有放疗增敏协同作用(q＝1.18)；免疫组织化学法检测结果显示，Ad－ING4－IL－24联合放疗可明显上调Bax和Caspase－3基因表达，下调Bcl－2及VEGF基因表达。
结论Ad－ING4－IL－24具有放疗增敏作用，是理想的放疗增敏剂，其作用机制可能与诱导肿瘤细胞凋亡和抑制血管形成有关。
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