表达HPV-16E6基因siRNA真核载体的构建及体外转染效率鉴定

来源 :重庆医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:woaijiekexun
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目的:采用RNA干扰技术选择性的沉默宫颈癌CaSki细胞株中HPV-16E6基因的表达。为观察HPV-16E6基因的小干扰片段能否在CaSki细胞特异性的抑制E6基因的表达,构建能在哺乳动物细胞中表达E6小干扰RNA的真核表达质粒,并观察其转染效率。方法:根据HPV-16E6基因序列,设计特异性的小干扰片段,并将其定向克隆到带有卡那霉素抗性和增强绿色荧光蛋白的真核表达载体pGenesil-1上,将其转染至CaSki细胞中,观察荧光表达,鉴定其转染效率:结果:通过酶切鉴定和序列测定,成功的构建二条表达小干扰
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