苦荞类过敏原的原核表达及多克隆抗体制备

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以苦荞种子发育期全长cDNA文库中获得的与甜荞16 kD过敏原同源的基因BALP(Buckwheat Allergen-like protein,BALP;GenBank登录号GO496294)为基础,构建了原核表达载体pET47b-BALP,实现了在大肠杆菌Rosetta gami2(DE3)中的高效表达,并对诱导表达的时间和IPTG的浓度进行了优化。利用钴离子螯合层析纯化了重组蛋白并制备了高效价的抗BALP多克隆抗体。结果表明,克隆的该苦荞类过敏原与已报道的甜荞16 kD过敏原在氨基酸序列上具有83%
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